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    三色雷蘑核糖核酸酶的分离纯化和理化性质


    【发布日期】:2019-08-13  【来源】:食用菌学报
    【作者】耿雪冉 张巧毅 常明昌 徐丽婧 程艳芬 王贺祥
    【机构】山西农业大学食品科学与工程学院 黄土高原食用菌提质增效协同创新中心 湖南农业大学东方科技学院 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室
    【摘要】依次采用离子交换层析(DEAE-Cellulose、CM-Cellulose和SP-Sepharose)和凝胶过滤层析(Superdex75 HR10/300 GL)从三色雷蘑(Leucopaxillus tricolor)子实体中分离纯化得到一种核糖核酸酶(Ribonuclease,RNase)。该酶比活为1406 U/mg,纯化倍数为154,通过HPLC-LTQ-Orbitrap测序得到4条肽段序列,分别为DMAVSYLSR、IGLSSIPR、ILGRFVVDTYK和SGKANAATPK。该核糖核酸酶的相对分子质量为15000,最适反应pH为9.0,最适反应温度为40℃,热稳定性高,80℃孵育1 h后能保持90%以上的活性:Cu2+、Ca2+、Mn2+、Cd2+和Al3+在1.25~10 mmol/L浓度下对该酶活性具有抑制作用,且抑制作用随着金属离子浓度的升高而变强;Fe2+在1.25~5 mmol/L的浓度下,Pb2+、Zn2+、Mg2+、Hg2+、Fe3+在1.25~2.5 mmol/L的浓度下对该酶的活性有促进作用。  
    【关键词】酶活力; 氨基酸序列; 相对分子质量; pH; 温度; 金属离子;
     
     
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